字典翻译 问答 初中 生物 呵呵,提取RNA过程?
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呵呵,提取RNA过程?
问题描述:

呵呵,提取RNA过程?

黄仁忠回答:
  现在常用的是Trizol法.   提前将研钵、研棒、剪刀、镊子等用锡箔纸包好200度烘烤6小时,与实验前放到冰箱中预冷.枪头、离心管等DEPC水浸泡处理12小时后,高温灭菌30分钟(也可不用DEPC处理,常规高温灭菌40分钟),整个处理过程必须带手套(最好带口罩),否则环境中的RNA酶会降解RNA.   1、取鲜样或者在-80度保存样品,液氮研磨样品至细小粉末,0.1g样品加入1mlTrizol混匀,室温静置5分钟.   2、12000rpm离心十分钟,取上清至一新的离心管中,加入0.2ml氯仿剧烈晃动15秒,室温静置2-3分钟   3、12000rpm离心十分钟,取上清至一新的离心管中,加入等体积异丙醇,混匀,室温静置10分钟   4、12000rpm离心十分钟,去除上清,用70%乙醇清洗2次,7500rpm离心五分钟,晾干.(不可过分干燥否则不易溶解)   5、加入适量DEPC水溶解沉淀
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