问题标题:
图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶
问题描述:
图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。下列不正确的是( )
A.图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖连接
B.若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,其产物长度为537bp、790bp、661bp
C.若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后形成重组质粒,那么应选用的限制酶是MboI
D.在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加相应抗生素的培养基进行培养
楼江回答:
C解析
分析:
A项中,DNA单链中相邻两个碱基之间通过“脱氧核糖—磷酸—脱氧核糖”连接,正确;B项中,SmaI识别的序列为CCCGGG,切割后会产生平末端;图1所示的DNA分子中含有两个SmaI的识别位点,第一个识别位点在左端534bp序列向右三个碱基对的位置;第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基对的位置,从这两个位点切割后产生的DNA片段长度分别为534+3,796-3-3,658+3,即得到的DNA片段长度分别为537bp、790bp和661bp,正确。C项中,能够获取目的基因并切开质粒的限制酶有识别序列为GGATCC的BamHI和识别序列为GATC的MboI,若使用MboI会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因,所以要用BamHI来切割目的基因和质粒,切割后保留了完整的抗生素B抗性基因,便于筛选出含有重组质粒的大肠杆菌。错误。D项中,重组质粒含有抗生素抗性基因,因此成功导入目的基因的大肠杆菌可以抗抗生素,因此一般需要用添加相应抗生素的培养基进行筛选。正确。
考点:
基因工程的操作程序
点评:
本题有一定的难度,是一道高考题的变式,考查了学生的识图能力、审题能力、理解能力。
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