①有丝分裂的实质是着丝点分裂，①正确； 　　②减数第一次分裂的实质是同源染色体分离，非同源染色体自由组合，②③正确； 　　④受精作用的实质是精子和卵细胞的细胞核融合，其中一半染色体来源于父方，一般来源于母方，同源染色体汇合，④正确； 　　⑤染色体复制形成的姐妹染色单体上含有相同的基因，⑤错误； 　　⑥基因分离的定律的实质是同源染色体上等位基因分离，时间是减数第一次分裂的后期，⑥正确； 　　⑦基因自由组合定律的实质是非同源染色体上非等位基因的自由组合，⑦正确； 　　⑧基因自由组合定律的时间是减数第一次分裂的后期，并不是受精作用过程中，⑧错误． 　　故选：C．