回答下列有关遗传信息传递与表达的问题．

纤维素分子因为分子量大，不能直接进入酵母细胞，并且酵母菌无法分解环境中的纤维素．为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，科学家欲将目的基因纤维素酶基因通过重组质粒导入酵母菌细胞．其所用质粒及其酶切位点如图甲，外源DNA上的纤维素酶基因及其酶切位点如图乙，根据要求回答以下问题：

（1）为了防止酶切片段的自身环化，实现工程目标，应选用限制酶___和___同时切割质粒和外源DNA．

（2）根据上述要求选择正确限制酶切割并获得重组质粒后，如果再用BamHⅠ限制酶切割重组质粒，则获得的酶切片段数为___．

（3）作用于图a位置的酶有___（多选）

A．DNA解旋酶B．DNA连接酶

C．DNA聚合酶

D．限制酶

科学家进一步构建了含3种不同基因片段的重组质粒，进行了一系列的研究．下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图．

（4）设置菌株Ⅰ作为对照，是为了验证___和___不携带纤维素酶基因．

（5）将菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ分别置于以纤维素为唯一碳源的培养基上，其中菌株Ⅱ不能存活，原因是缺少___，导致___．