如图是利用大肠杆菌生产埃博拉病毒（EBOV）VP40蛋白的过程．请据图回答：

（1）①利用PCR技术扩增目的基因的过程中，反应体系内要加入___，PCR的全称是___，第___次复制的产物中才开始出现目的基因．

（2）过程②构建基因表达载体时选用EcoRI和XhoI双酶切的优点是___，目的基因与质粒连接形成重组DNA后含有___个游离的磷酸基团．

（3）基因表达载体A的组成除了目的基因外，还必须有___，过程③VP40基因进入大肠杆菌细胞，并在大肠杆菌内维持稳定和表达，该过程可称为___．

（4）检测过程④是否成功表达，通常从分子水平进行检测的方法是___．