问题标题：
【PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带】
问题描述：
PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带
董兴法回答：
如果实验目的只是基因型鉴定,对PCR产物无其他要求的话,二聚体并非不能忍受,可以尝试以下方法优化反应条件：
1.确定DNA模板为阳性,即确定含有目标序列；
2.对退火温度设置温度梯度,琼脂糖电泳检测是否有目标条带,即使可能并不清晰；
3.选取最清晰的温度,在PCR体系中设置镁离子浓度梯度,选取最理想的条件.
如果是以前曾经成功扩增、现在条件一样却没法重复的,个人经验要特别注意下模板DNA的质量、尤其是PH值.另外由于不清楚您实验的细节、所用试剂和反应条件,如有误解还请见谅...
点击显示
生物推荐
热门生物推荐