问题标题：
sumo融合蛋白的纯化时挂在Ni亲和柱上时是不是就还可以加sumo蛋白酶酶切,还是必须洗下来以后才能酶切?有没有人做过类似实验?
问题描述：
sumo融合蛋白的纯化时挂在Ni亲和柱上时是不是就还可以加sumo蛋白酶酶切,还是必须洗下来以后才能酶切?有没有人做过类似实验?
陈增伟回答：
不是绝对的,两种方法其实都差不多.
但是柱切和洗脱后酶切还是有不同的.
柱切比较方便,酶切之后直接收流穿的部分就是目的蛋白.缺点是在洗脱之前不知道蛋白产量,可能努力了半天什么都没有,而且有些蛋白不稳定,可能在柱切过程中沉淀在柱子上了.
洗脱后再切,比较直观的检测初步富集的蛋白量,再决定加多少酶,而且能直观的检测酶切效率,确定是酶切之后要多一个去标签的过程.
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