首先根据你的实验需要选择相应的载体 　　其次分析你的基因序列以及载体序列上的酶切位点,切记在载体上所选择的酶切位点要和你的基因序列上相一致,并且这两个酶切位点在你的基因序列中并不存在,否则会将基因切断 　　再次就是对基因和载体进行酶切了,基因要是直接用带有酶切位点的引物进行PCR的话就不用再酶切了.酶切之后进行连接,一般都有连接试剂盒的. 　　最后的重组质粒要转化至大肠杆菌中进行扩增,然后提取这个质粒进行酶切鉴定.