问题标题：
SDS-PAGE样品上样前为什么要加热?加热后的沉淀是什么东西?不是目标蛋白吗?加热后不都沉淀下来了哪跑的是什么东西呢?感谢美和vivian，据我所了解，沉淀的蛋白质是不会在胶中移动的，我现
问题描述：
SDS-PAGE样品上样前为什么要加热?
加热后的沉淀是什么东西?不是目标蛋白吗?加热后不都沉淀下来了哪跑的是什么东西呢?
感谢美和vivian，据我所了解，沉淀的蛋白质是不会在胶中移动的，我现在是这样理解的：上样的蛋白，也就是目标蛋白加热不会沉淀出来。沉淀出来的不会是目的蛋白。它们被DTT打开了二硫键，SDS结合这些变性的蛋白就成了SDS-PAGE。
孙蕾回答：
蛋白质电泳前,需用样品缓冲液处理,样品缓冲液中除SDS外,还有还原剂β-巯基乙醇,它可将蛋白质分子中的S-S（二硫键）还原.电泳样品制备时加热,就是为了加速这些组分与蛋白质的反应.
问一下你们试验提取的是不是总蛋白?还是特定的一种蛋白?我想应该是提的总蛋白,那么就应该做到：尽量提取完全；应使所有蛋白全部处于溶解状态；防止发生蛋白的降解、聚集、沉淀、变性.看看你的目的蛋白的特性,是亲水性的还是疏水性的,再决定留上清还是沉淀,如你的样品是蛋白质沉淀物,加入50--100ul的SDS加样缓冲液并在同样加热后在上样
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