问题标题:
【研究者取野生型小鼠(Ⅰ+Ⅰ+)的胚胎干细胞,转入含neor基因(新霉素抗性基因)的DNA片段,定向突变Ⅰ+基因(结果如图1),再将突变的胚胎干细胞移回野生型小鼠胚胎,培育出带突变基】
问题描述:
研究者取野生型小鼠(Ⅰ+Ⅰ+)的胚胎干细胞,转入含neor基因(新霉素抗性基因)的DNA片段,定向突变Ⅰ+基因(结果如图1),再将突变的胚胎干细胞移回野生型小鼠胚胎,培育出带突变基因(Ⅰ-)的杂合子小鼠.
(1)将外源DNA片段导入胚胎干细胞后,需用含___的培养基培养细胞,以筛选得到突变的胚胎干细胞
(2)用此杂合体小鼠与野生型小鼠进行杂交实验,并通过DNA分子杂交技术检测小鼠的基因型,结果如图2.
①检测小鼠的基因型,需根据___序列设计DNA分子探针.根据杂交实验结果推测,I基因的功能是与___(性状)有关.
②分析系谱图___(能/不能)判断Ⅰ+、Ⅰ-基因的显、隐性.
③只有突变基因来自___(父本/母本)时,杂合子小鼠才表现出发育迟缓,由此推测来自___的I基因在体细胞中不表达.
④提取小鼠体细胞的总RNA,加入Actin基因(编码细胞骨架蛋白)和neor基因的RNA探针,之后加入RNA酶水解单链RNA.若探针能与细胞样品的RNA结合成双链RNA则不被酶水解而保留,电泳分析时呈现明显条带(在记录实验结果时,有明显条带用“+”表示,无明显条带用“一”表示).请将支持③推测的实验结果填入表中ⅰ、ⅱ、ⅲ处.
Actin基因的RNA探针 | + | + | + |
neor基因的RNA探针 | ⅰ___ | ⅱ___ | ⅲ___ |
曲长征回答:
(1)根据题干“入含neor基因(新霉素抗性基因)的DNA片段”,可以推断出:需用含新霉素的培养基培养细胞,如果细胞存活,说明具有抗新霉素的功能,是突变的胚胎干细胞;如果不能存活,说明不是突变的胚胎干细胞.(...
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