单菌落得获得在于你涂布时候菌种原液的浓度 　　无论你怎么涂,肯定都会有一定的浓度梯度,在稀释到一定程度的时候,你可以理解为有一定的阈值,这样只有部分区域可以培养形成菌落. 　　说到底关键在于原液的浓度和培养条件合适,涂布的方式是次要的,只要均匀的涂开,相当于确保稀释的效果,就可以培养到单菌落. 　　不知道你是否满意.