（2011•普陀区二模）在基因工程中通常需要利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物．PCR如右图示，包括三个基本反应步骤：①模板DNA的变性：模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后双链解离；②模板DNA与引 物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链结合形成DNA模板--引物结合物；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，合成一条新的与模板DNA 链互补的脱氧核苷酸链．重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得较多的目的基因．

（1）温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链结合形成DNA模板--引物结合物时所遵循的原则是______．

（2）在PCR技术中，引物的作用是______．

（3）从理论上推测，第三轮循环产物中含有引物B的DNA片段所占比例为______．

（4）下图表示利用PCR技术获取目的基因X的第一次循环产物．则至少需要在______轮循环产物中才能开始出现独立且完整的X基因．如果经过n次循环，则产物中①所示DNA分子数为______．

（5）用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点．