问题标题:
【蛋白纯化出来后发现实际值比理论值小10KD的原因】
问题描述:
蛋白纯化出来后发现实际值比理论值小10KD的原因
刘玉琼回答:
这个是发酵表达后分子量就偏小还是纯化后分子量偏小?
如果是纯化后,有可能是纯化中找错了目标条带,也有可能是SDS-PAGE检测分子量偏小,那不能说明真的是偏小的,SDS-PAGE是表观分子量,要确认需要质谱或者分子排阻确认.
可以先基因测序确认下构建表达是否正确,如果蛋白质有亲和标签,可以检测WB确认是否还是带着标签的结构.最后样品可以去质谱检测确认真实分子量
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