图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线．图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉索抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点．

据图回答下面的问题．

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用___限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因．

（2）筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含___的培养基上进行．能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是___（填字母代号）．

A．启动子 B．teR C．复制原点 D．ampR

（3）过程①可采用的操作方法是___．

（4）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用___（填字母代号）技术．

A．核酸分子杂交 B．基因序列分析 C．抗原-抗体杂交 D．PCR

（5）基因工程中最常用的载体是质粒，除此之外，还可以有___和___．