字典翻译 问答 初中 生物 胰岛素A、B链分别表达法是生成胰岛素的方法之一,图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛
问题标题:
胰岛素A、B链分别表达法是生成胰岛素的方法之一,图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛
问题描述:

胰岛素A、B链分别表达法是生成胰岛素的方法之一,图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛素A、B链融合的蛋白),请回答下列问题:

(1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是___.

(2)图1中启动子是___酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达,氨苄青霉素抗性基因的作用是___.

(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有___.

(4)β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于___.

(5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链,且β-半乳糖苷酸被切成多个肽段,这是因为___.

(6)根据图2中胰岛素的结构,请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量,你得推测结果是___,理由是___.

董亚卓回答:
  (1)根据题意和图示分析可知:图1基因表达载体中已有目的基因、启动子和标记基因,所以没有标注出来的基本结构是终止子.   (2)图1中启动子是RNA聚合酶酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达即转录过程;氨苄青霉素抗性基因的作用是作为标记基因,将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来.   (3)构建基因表达载体的过程中,必须用相同的限制酶切割(含目的基因的外源DNA分子)和运载体,以产生相同的黏性末端,再加入DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子.   (4)β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,这样可以防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解.   (5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,由于β-半乳糖苷酶中含有多个甲硫氨酸,而胰岛素的A、B链中不含甲硫氨酸,所以用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链,且β-半乳糖苷酸被切成多个肽段.   (6)由于一个肽链中至少有一个游离的氨基和一个游离的羧基,在肽链内部的R基中可能也有氨基和羧基,而胰岛素含有A链和B链,所以每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量至少是2个.   故答案为:   (1)终止子   (2)RNA聚合酶  作为标记基因,将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来   (3)限制酶和DNA连接酶   (4)防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解   (5)β-半乳糖苷酶中含有多个甲硫氨酸,而胰岛素的A、B链中不含甲硫氨酸   (6)至少2个  两条肽链的一端各有一个游离的氨基,氨基酸R基团中可能还含有游离的氨基
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