问题标题:
海栖热袍菌生活在55~90℃的海底火山口处水域,其产生的乳酸脱氢酶(LDH)具有极强耐热性.研究人员利用基因工程技术生产该酶以用于工业制备NAD+(一种辅酶),基本技术流程如图.请
问题描述:
海栖热袍菌生活在55~90℃的海底火山口处水域,其产生的乳酸脱氢酶(LDH)具有极强耐热性.研究人员利用基因工程技术生产该酶以用于工业制备NAD+(一种辅酶),基本技术流程如图.请回答:
(1)过程①中,应提取___的基因组DNA作模板;同时根据___基因的核苷酸序列合成引物,过程①中使用的工具酶为___
(2)进行过程③前,利用___处理大肠杆菌,使其成为感受态细胞.
(3)过程④中,应将大肠杆菌置于___条件下诱导培养;然后提取大肠杆菌的___进行检测,以鉴定目的基因是否成功表达,此方法称为___.
李英博回答:
(1)分析过程图可知,过程①是利用PCR技术扩增目的基因,应提取海栖热袍菌的基因组DNA作模板;同时根据LDH(或目的)基因的核苷酸序列合成引物,该过程①中使用的工具酶为耐高温的Taq酶.
(2)过程③是将目的基因导入受体细胞,需利用Ca2+(或CaCl2)处理大肠杆菌,使其成为感受态细胞.
(3)过程④是目的基因的检测与鉴定,根据42℃条件下启动子活性完全激发的特点,应将大肠杆菌置于42℃条件下诱导培养;然后提取大肠杆菌的蛋白质进行检测,以鉴定目的基因是否成功表达,此方法称为抗原-抗体杂交法.
故答案为
(1)海栖热袍菌 LDH(或目的) Taq酶
(2)Ca2+(或CaCl2)
(3)42℃蛋白质 抗原-抗体杂交法
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