某研究小组欲将已知抗除草剂基因导人原生质体培育抗除草剂大豆．请回答下列问题：

（1）为获得大量抗除草剂基因，可通过___技术进行扩增，也可将其连接到___上，通过大肠杆菌培养扩增．

（2）制备叶片原生质体的酶混合液中，一般含较高浓度的甘露醇，其目的是避免制备的原生质体___．无菌原生质体的制备过程中，整个无菌操作过程需在___中进行．

（3）可通过___方法，直接将抗除草剂基因导入原生质体的细胞核．此外，还可用___融合、电击等方法导入．导入后的原生质体需再生出___，经持续分裂获得愈伤组织，进一步分化获得再生植株并扩大繁殖．

（4）利用带有标记的抗除草剂基因特殊片段与从转基因植株提取的RNA进行___，验证抗除草剂基因是否被整合到受体的细胞中并转录．