问题标题:
屠呦呦获得诺贝尔生理学奖后,最新研究表明,青蒿素还可用于糖尿病的治疗.研究人员利用基因工程培育出高产的转基因青蒿.(1)青蒿的cDNA文库,是以从青蒿细胞中提取的___为模板,
问题描述:
屠呦呦获得诺贝尔生理学奖后,最新研究表明,青蒿素还可用于糖尿病的治疗.研究人员利用基因工程培育出高产的转基因青蒿.
(1)青蒿的cDNA文库,是以从青蒿细胞中提取的___为模板,通过___(方法)建立,该文库中的基因___(填“含有”或“不含有”)启动子.
(2)基因工程操作的核心步骤是___.若选择的限制酶切出的DNA片段是平末端,应选择___进行连接.
(3)目的基因的大量扩增可以采用___技术,该技术的原理是___,该技术中需使用一种特殊的酶是___.
孙岳明回答:
(1)cDNA文库是以mRNA为模板,通过反转录法建立的;由于启动子和终止子不能转录形成mRNA,因此以mRNA为模板逆转录形成的cDNA中不含有启动子、终止子等结构.
(2)基因工程操作的核心步骤是基因表达载体的构建;根据酶的来源不同,DNA连接酶分为两类:E.coliDNA连接酶、T4DNA连接酶,这二者都能连接黏性末端,此外T4DNA连接酶还可以连接平末端,但连接平末端时的效率比较低.
(3)PCR技术可在体外大量扩增目的基因,其原理是DNA复制.PCR在较高温度下进行,因此该技术中需使用一种特殊的酶是热稳定的DNA聚合酶(Taq酶).
故答案为:
(1)mRNA 反转录 不含有
(2)基因表达载体的构建 T4DNA连接酶
(3)PCR DNA(双链)复制 热稳定的DNA聚合酶(Taq酶)
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