问题标题:
基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术.“基因敲除细胞”的构建过程如下:第一步:从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞(ES),在培养基中扩增.这些细胞中需要改造的基因称
问题描述:
基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术.“基因敲除细胞”的构建过程如下:第一步:从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞(ES),在培养基中扩增.这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”.
第二步:构建基因表达载体.取与靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neoR(新霉素抵抗基因)等.由于同源臂与靶基因的DNA正好配对,所以能像“准星”一样,将表达载体准确地带到靶基因的位罝.
第三步:将表达载体导入胚胎干细胞,并与其内把基因同源重组,完成胚胎干细胞的基因改造.
第四步:基因改造后的胚胎干细胞增殖、筛选.基本厣理如图所示:
请根据上述资料,回答下列问题:
(1)实施基因工程的核心步骤是___,基因表达载体中的___是位于基因首端的有特殊结构的DNA片段;在构建的过程中所需要的工具酶是___.
(2)如果要获得一只含目的基因的小鼠,则选择的受体细胞通常是___,原因是___.
(3)上述资料中neoR基因的作用最可能是___.为了鉴定目的基因是否成功表达,有时进行抗原-抗体杂交,目的蛋白相当于___.
(4)该项技术具有广阔的应用前景,请试举一例:___.
方亮回答:
(1)基因工程的操作步骤:①目的基因的获取;②基因表达载体的构建;③将目的基因导入受体细胞;④目的基因的检测与表达.因此,将目的基因导入受体细胞前应先完成基因表达载体的构建.基因表达载体中的启动子是位...
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