问题标题:
【质粒dna去磷酸化在哪些情况下使用】
问题描述:
质粒dna去磷酸化在哪些情况下使用
李素昉回答:
主要是防止质粒载体的自身连接,最常用于质粒进行平端连接时.
去磷酸化是由于,DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在,载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团.
此时如果不进行去磷酸化处理,在后续连接反应中载体自身会优先进行连接,你的目的片段可能就无法插入.
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