问题标题：
请回答下列有关基因工程的问题．下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点．图1是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点．限制
问题描述：
请回答下列有关基因工程的问题．
下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点．图1是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点．
识别序列及 切割位点 |
（2）图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是___
（3）图2是用___（限制）酶进行切割得到的目的基因．可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化．
（4）人体细胞内含有抑制癌症发生的某基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测．该基因含有800对碱基对（bp），用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp，．用EcoRⅠ再次切割得到100bp，300bp，150bp，50bp，200bp．而患者体内获取的这段基因，用BamHⅠ切割得到的区段变为400bp，400bp，用EcoRⅠ再次切割得到100bp，300bp，150bp，250bp．在正常人体内BamHⅠ和EcoRⅠ识别序列分别有___个和___个，患者体内发生了___．
刘俭回答：
（1）质粒作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来．基因工程中还可以用病毒（噬菌体或动植物病毒）作为运载体．
（3）SmaI酶会破坏目的基因和质粒的标记基因（抗性基因），因此图中构建重组质粒时不能使用SmaI酶切割．
（3）根据图中DNA片段两侧的黏性末端可知，左侧是用限制酶BamHI切割形成的，右侧是用限制酶HindⅢ切割形成的，这样可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化．
（4）该基因用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp三种长度的DNA片段，说明在正常人体内BamHⅠ的识别序列有2个；用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp后，再用EcoRⅠ再次切割得到100bp，300bp，150bp，50bp，200bp，说明400bp被切割成100bp，300bp，其中一个200bp被切割成150bp，50bp，可见EcoRⅠ识别序列也有2个．患者体内获取的这段基因，用BamHⅠ切割得到的区段变为400bp，400bp，用EcoRⅠ再次切割得到100bp，300bp，150bp，250bp，说明有一个BamHⅠ识别序列发生了基因突变，不能被BamHⅠ切割．
故答案为：
（1）噬菌体或动植物病毒
（2）SmaI酶会破坏目的基因和质粒
（3）BamHⅠ和HindⅢ
（4）2 2 基因突变
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