问题标题:
科学家将人的生长激素基因与某种细菌(不含抗生素抗性基因)的DNA分子进行重组,并成功地在该细菌中得以表达(如图).请据图分析回答:(1)过程①所示获取目的基因的方法是______.
问题描述:
科学家将人的生长激素基因与某种细菌(不含抗生素抗性基因)的DNA分子进行重组,并成功地在该细菌中得以表达(如图).请据图分析回答:
(1)过程①所示获取目的基因的方法是______.
(2)细菌是理想的受体细胞,这是因为它______.
(3)质粒A与目的基因结合时,首先需要用______酶将质粒切开“缺口”,然后用______酶将质粒与目的基因“缝合”起来.
(4)若将细菌B先接种在含有______的培养基上能生长,说明该细菌中已经导入外源质粒,但不能说明外源质粒是否成功插入目的基因;若将细菌B再重新接种在含有______的培养基上不能生长,则说明细菌B中已经导入了插入目的基因的重组质粒.
(5)检测工程菌中的生长激素基因是否转录出mRNA和是否翻译出生长激素,可采用的技术分别是______、______.
沈卓炜回答:
(1)由图可知,①过程中获取目的基因的方法是反转录法(逆转录法).
(2)细菌繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少,是基因工程中理想的受体细胞.
(3)构建基因表达载体时,先用限制酶酶切割质粒,再用DNA连接酶将质粒与目的基因连接形成重组质粒.
(4)由图可知,构建基因表达载体时,目的基因的插入破坏了四环素抗性基因,但没有破环氨苄青霉素抗性基因,因此导入重组质粒的细菌能在含有氨苄青霉素的培养基上生存,但不能在含有四环素的培养基上生存.若将细菌B先接种在含有氨苄青霉素的培养基上能生长,说明该细菌中已经导入外源质粒,但不能说明外源质粒是否成功插入目的基因;若将细菌B再重新接种在含有四环素的培养基上不能生长,则说明细菌B中已经导入了插入目的基因的重组质粒.
(5)检测工程菌中的生长激素基因是否转录出mRNA,可采用分子杂交技术;检测生长激素基因是否翻译出生长激素,可采用抗原-抗体杂交技术.
故答案为:
(1)反转录法(逆转录法)
(2)繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少
(3)限制性内切酶 DNA连接酶
(4)氨苄青霉素 四环素
(5)分子杂交 抗原-抗体杂交
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