底物水平磷酸是在酶的催化下,在底物的水平上直接生成ATP 　　在一分子葡萄糖有氧氧化时,先生成2分子3-磷酸甘油醛,准备阶段消耗两个ATP 　　一分子3-磷酸甘油醛,再生成1,3-二磷酸甘油酸,一直到最后的丙酮酸,有2次磷酸基团的转移,这都属于底物水平的磷酸化,生成ATP. 　　所以糖酵解中,一共生成4个ATP,净生成2个ATP 　　一分子丙酮酸变成乙酰CoA后进入在柠檬酸循环,在琥珀酰CoA到琥珀酸的过程有生成一个GTP,是GDP与Pi直接生成,也是底物水平磷酸化.