巧克力培养基 　　【用途】主要用于嗜血杆菌的分离,亦可用于奈瑟菌的增菌培养. 　　【原理】流感嗜血杆菌培养时,需要依赖血液中的X及V因子方能生长繁殖,当培养基加热至80～90℃时,可使血液中的红细胞破裂,以利于嗜血杆菌,奈瑟菌等的生长培养.凡疑有这些菌种存在的标本,均应接种巧克力平板.血液标本培养,增菌后又细菌生长,若移种巧克力平板上,有利于分离更多的细菌. 　　【成分】牛肉浸出液1L蛋白胨10氯化钠5琼脂15无菌脱纤维马血、羊血或兔血100mlpH7.7.4 　　【制备】将前四项成分混合,加热溶化,校对pH,高压灭菌（121℃15min）后在80～90℃以无菌方法加入血液,摇匀后置90℃水浴中.维持该温度15min,使之呈巧克力色取出,至室温冷至约50℃,倾制平板.凝固后,抽样置于35℃培养18～24h,如无细菌生长,冷藏备用. 　　【接种】将可疑标本直接划线接种于该培养基上,置35℃普通培养或置含5%～10%二氧化碳环境培养18～24h,取出观察细菌生长状况. 　　【观察结果】流感嗜血杆菌菌落微小(0.8mm),无色透明、光滑整齐、似露滴状,48h后达1.5mm,从血液或脑脊液中分离的菌落往往形成液状,菌落较大,老培养物菌落中心呈凹陷. 　　【质量控制】流感嗜血杆菌ATCC10211,生长良好,菌落典型.肺炎链球菌,ATCC6305,生长良好,菌落典型. 　　【保存】置冰箱,1周内用完.