问题标题:
【人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选.利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示(注:基因B为高血压相关基因).(1)进行①过程之】
问题描述:
人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选.利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示(注:基因B为高血压相关基因).
(1)进行①过程之前,需对人工采集的精子进行___处理.完成②过程常采用的方法是___,④过程中,为了防止污染,通常还要在细胞培养液中添加一定量的___.
(2)从人体细胞中获取基因B时用到的工具酶是___,在构建的基因表达载体中,高血压相关基因的首端必须有___,它是RNA聚合酶的识别和结合部位.
(3)图示中甲为___(时期)的去核卵母细胞,⑤过程操作技术叫做___.
(4)要在分子水平上检测成功导入的B基因在大鼠中是否成功表达,可采用___方法,如果高血压相关基因已在大鼠体内成功表达,可用其建立高血压转基因动物模型.
罗国安回答:
(1)①表示体外受精过程,在该过程之前,需对人工采集的精子进行获能处理;②是将目的基因导入受体细胞的过程,当受体细胞是动物细胞时,常采用显微注射法;④表示动物细胞培养过程,该过程需要无菌、无毒的条件,因此为了防止污染,通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素.
(2)从人体细胞中获取目的基因(基因B)时需要用到限制性核酸内切酶(限制酶);基因表达载体的组成部分:启动子、目的基因、标记基因、终止子,其中启动子是RNA聚合酶的识别和结合部位.
(3)图示⑤为核移植过程,该过程中的受体细胞甲为减数第二次分裂中期的去核卵母细胞.
(4)基因表达的产物是蛋白质,因此要在分子水平上检测成功导入的B基因在大鼠中是否成功表达,可采用抗原-抗体杂交方法,如果高血压相关基因已在大鼠体内成功表达,可用其建立高血压转基因动物模型.
故答案为:
(1)获能 显微注射法 抗生素
(2)限制性核酸内切酶(限制酶) 启动子
(3)减数第二次分裂中期(MII中期) 核移植
(4)抗原-抗体杂交
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