问题标题:
realtimePCR看家基因的选择重要吗
问题描述:
realtimePCR看家基因的选择重要吗
陈青华回答:
非常重要,因为根据原理,RT-PCR是假设看家基因的表达恒定从而得出目标基因的相对含量
所以,必须要确保看家基因本身不会受到实验条件的影响,即看家基因在对照组与实验组具有相同的表达量
请仔细阅读原始文献
Analysisofrelativegeneexpressiondatausingreal-timequantitativePCRandthe2(-DeltaDeltaC(T))Method
安宗旭回答:
很多实验室都默认使用actin或者18s?这俩可靠吗
陈青华回答:
一个细胞骨架,一个核糖体结构,理论上都是细胞必须且稳定表达的,是广泛使用的看家基因。无论用哪种,最好还是要跑一下是否不受实验处理的影响,不要直接使用
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