问题标题:
人工构建的大肠杆菌质粒pBV220是基因工程中应用最广泛的载体,结构如图所示.其中PRPL是启动子,rrB是基因转录终止信号,Ampr是氨苄青霉素抗性基因,ori是质粒复制起点,EcoRⅠ、HindⅢ、Bam
问题描述:
人工构建的大肠杆菌质粒pBV220是基因工程中应用最广泛的载体,结构如图所示.其中PRPL是启动子,rrB是基因转录终止信号,Ampr是氨苄青霉素抗性基因,ori是质粒复制起点,EcoRⅠ、HindⅢ、BamHⅠ、PstⅠ均为限制性内切酶.回答下列问题:
(1)该质粒的化学本质是___,从图中可看出,pBV220作为运载体具备的条件有___.
(2)将目的基因与此质粒构建基因表达载体时,通常用图中___两种限制酶切割此质粒,其优点是___.用这两种酶可以切开此质粒的___个磷酸二酯键,并且会___(填“消耗”或“产生”)同样数量的水分子.
(3)将构建好的基因表达载体导入大肠杆菌前,需用___处理大肠杆菌,使之成为___细胞,以提高转化效率.
顾雪峰回答:
(1)质粒是小型环状DNA,从图中可看出,pBV220作为运载体具备的条件有具有多个限制酶的切割位点、具有标记基因.(2)分析图解可知,图中PRPL是启动子,rrB是基因转录终止信号,而目的基因应位于两者之间,因此将目...
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