问题标题:
请问DMEM/F12培养液配制怎么具体配置?
问题描述:
请问DMEM/F12培养液配制怎么具体配置?
钱峰回答:
DMEM/F12培养基说明书
产品代号:MD207-050
一.【组成成分】
成分mg/L成分mg/L成分mg/L
无水氯化钙116.6L-亮氨酸59.05亚油酸0.042
五水硫酸铜0.0013L-赖氨酸盐酸盐91.25硫辛酸0.105
九水硝酸铁0.05L-蛋氨酸17.24酚红8.1
七水硫酸亚铁0.417L-苯丙氨酸35.481,4-丁二胺二盐酸盐0.081
氯化钾311.8L-丝氨酸26.25丙酮酸钠55
氯化镁28.64L-苏氨酸53.45维生素H0.0035
无水硫酸镁48.84L-丙氨酸4.45D-泛酸钙2.24
氯化钠6999.5L-天门冬酰胺7.5氯化胆碱8.98
无水磷酸二氢钠54.35L-天门冬氨酸6.65叶酸2.65
磷酸氢二钠71.02L-半胱氨酸盐酸盐17.56i-肌醇12.6
七水硫酸锌0.432L-谷氨酸7.35烟酰胺2.02
L-精氨酸盐酸盐147.5L-脯氨酸17.25盐酸吡哆醛2
L-胱氨酸盐酸盐31.29L-色氨酸9.02盐酸吡哆醇0.031
L-谷氨酰胺365L-酪氨酸38.4核黄素0.219
甘氨酸18.75L-缬氨酸52.85盐酸硫胺2.17
L-组氨酸盐酸盐31.48D-葡萄糖3151胸苷0.365
L-异亮氨酸54.47次黄嘌呤2维生素B120.68
二.【产品指标】
外观粉红色固体粉末
溶解性完全溶解,溶液澄明.
pH值
①加NaHCO36.60~7.20
②不加NaHCO35.50~6.10
水分(%)≤5.0
渗透压(mOsm/kgH2O)
①加NaHCO3274~302
②不加NaHCO3238~263
细菌内毒素(EU/ml)≤10
微生物检查(CFU/g)≤1000
细胞生长试验细胞形态与标准细胞形态相似
细胞数量加10%小牛血清培养4天,细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞/ml.
三.【配制方法】
⑴将一袋培养基全部倒入一容器中,用少量注射用水将袋内残留培养基洗下,并入容器.加注射用水(水温20℃~30℃)到950毫升,轻微搅拌溶解.
⑵加入2.438克碳酸氢钠.
⑶轻微搅拌溶解,加注射用水至1升.
⑷用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调pH至所需值.
⑸用0.2μm滤膜正压过滤除菌.
⑹溶液应在2℃-8℃下避光保存.
四.【贮藏】2℃-8℃冷藏,干燥、密封、避光贮藏.
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