Km值指的是酶在达到最大反应速度一半时的底物浓度,Vmax指的是酶的最大反应速度.这两个值,Vmax是可以直接测出来的,Km值则需要计算.测Vmax时,首先设计含有不同浓度的底物的酶反应体系,然后测定这些反应体系中的产物生成速度.一般当底物浓度增加到某一值时,产物生成速度就不会再增加,这时的产物生成速度就是酶的最大反应速度Vmax.如果要求Km值,你需要按照米曼氏方程所提供的4种作图方式任意一种,作出曲线,然后通过计算求得Km值.举例来说,最简单的就是以产物生成速度作为纵坐标,以底物浓度作为横坐标,然后作出S曲线图,然后将这个曲线拟合成方程（逻辑斯蒂方程）,然后根据方程带入数值求出Km值.这个方法求方程比较麻烦,一般建议使用双倒数作图,也就是1/V为纵坐标,1/底物浓度为横坐标作图,此时的函数曲线是一条直线,而横轴的截距就等于-1/Km.